摘要

目的探讨特异性嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对不同表皮生长因子受体(EGFR)表达肿瘤的杀伤效应。方法北部战区总医院呼吸与危重症医学科已制备所需CAR-T细胞, 将其分为UTD对照组、EGFR CAR-T组和CD19 CAR-T组。选取H23非小细胞肺癌细胞系、SKOV3卵巢癌细胞系、Hela宫颈癌细胞系及人胃癌细胞系(HGC)27胃癌细胞系, 采用流式细胞术检测肿瘤细胞表面EGFR表达情况, 通过免疫磁珠分选技术分选SKOV3和Hela细胞, 分选得到EGFR阳性率更高的肿瘤细胞, 采用流式细胞术检测其表达EGFR阳性率。将UTD对照组、EGFR CAR-T组和分化抗原簇(CD)19 CAR-T组分别与不同EGFR阳性率肿瘤细胞共培养, 通过实时无标记细胞功能分析仪(RTCA)检测其对多种EGFR表达率肿瘤细胞的杀伤曲线。结果流式细胞术检测H23、SKOV3、Hela及HGC27细胞系的EGFR阳性率分别为83.7%、73.8%、48.3%和6.1%。免疫磁珠法分选后SKOV3及Hela细胞系EGFR表达率为81.1%和64.2%。RTCA法证实EGFR CAR-T组能够杀伤EGFR高表达的H23细胞, 对EGFR低表达的HGC27细胞无明显杀伤作用, 差异有统计学意义(P<0.001)。与SKOV3及Hela细胞比较, EGFR CAR-T细胞组对分选后SKOV3及分选后Hela细胞杀伤更强, 差异有统计学意义(P<0.001)。结论不同肿瘤细胞EGFR表达阳性率不同, 针对EGFR的CAR-T细胞能够杀伤EGFR阳性的肿瘤细胞, 且肿瘤细胞EGFR表达率越高对其杀伤作用越强。