胚胎干细胞条件培养基对过氧化氢引起心肌细胞凋亡的影响

作者：谢茹梦; 李健楠; 李果; 袁野; 任何群; 张妍^*

来源：哈尔滨医科大学学报, 2021, 55(04): 333-339.

• 胚胎干细胞条件培养基
• 氧化应激
• 乳鼠心肌细胞
• 心肌细胞凋亡

目的研究胚胎干细胞条件培养基是否可以抑制过氧化氢引起的心肌细胞凋亡及其潜在的作用机制。方法收集培养小鼠胚胎干细胞24 h的培养液作为胚胎干细胞条件培养液,将大鼠乳鼠原代心肌细胞随机分为四组:空白对照组、H2O2(100μmol/L)处理组、对照培养液组和胚胎干细胞条件培养液组,其中对照培养液组和胚胎干细胞条件培养液组分别在原代心肌细胞中加入胚胎干细胞培养基、胚胎干细胞条件培养基后,再用100μmol/L H2O2处理4 h。通过MTT方法检测心肌细胞活力;通过细胞活性/毒性试剂盒检测心肌细胞存活情况;通过TUNEL凋亡试剂盒和电镜技术检测心肌细胞凋亡情况;通过激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子变化;通过Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase3的表达情况。结果 MTT结果显示,与H2O2组相比,ES-CM组心肌细胞活力下降的现象明显得到抑制(P<0.05)。细胞活性/毒性试剂盒检测结果表明,与H2O2组相比,ES-CM组活细胞的百分数下降的现象明显得到抑制(P<0.05)。TUNEL凋亡试剂盒检测结果表明,与H2O2组相比,ES-CM组细胞凋亡百分数增加的现象明显得到抑制(P<0.05)。共聚焦显微镜检测的数据表明,与H2O2组相比,ES-CM组[Ca2+]i强度增加的现象明显得到抑制(P<0.05)。Western blot结果表明,与H2O2组相比,ES-CM组Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05),Caspase3蛋白表达明显减少(P<0.05),而胚胎干细胞培养基组与H2O2处理组相比无显著变化(P>0.05)。结论胚胎干细胞条件培养基通过影响凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡。

• 单位
  哈尔滨医科大学