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摘要
该研究利用实时无标记细胞分析系统(xCELLigence real-time cell analysis system,RTCA)建立气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)收缩舒张效应检测方法。筛选适宜细胞接种密度,接种于RTCA检测板中监测细胞动态生长曲线;利用组胺刺激细胞收缩,并计算组胺半数抑制浓度(IC50);在适宜组胺刺激浓度的基础上,利用特布他林模拟细胞舒张效应,并计算半数有效浓度(EC50)。结果显示,ASMCs为4 000个/孔接种密度培养于(16±4) h区间内,符合后续实验需求;组胺作用ASMCs 2 h后的IC50为8.07 mmol/L,故选择8 mmol/L组胺刺激ASMCs可见较为明显的收缩效应;特布他林作用ASMCs 2 h后的EC50为8.08×10–8 mol/L,故浓度为10 μmol/L和20 μmol/L的特布他林可检测到明显舒张效应(P<0.05)。利用RTCA可以稳定、有效、可靠地检测ASMCs收缩舒张效应,为以ASMCs为主要研究对象的呼吸系统疾病提供参考数据和准确的检测方法。
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单位上海中医药大学; 上海市针灸经络研究所
