星形胶质细胞来源细胞外囊泡促进大鼠神经干细胞向神经元的分化

作者：蔡闯; 黄永辉; 曹兴兵; 孙海涛; 贯世豪; 黄文康; 韩博

来源：中国组织工程研究, 2022, 1-7.

• 神经干细胞
• 星形胶质细胞
• 细胞外囊泡
• 中枢神经系统疾病
• 神经元
• 分化
• 脊髓损伤
• 神经修复

背景：神经干细胞具有向神经元分化的潜能，已有报道表示星形胶质细胞与神经元存在密切联系，而有关星形胶质细胞来源细胞外囊泡是否具有促进神经干细胞向神经元高效分化的作用，仍未见相关报道。目的：探索星形胶质细胞来源细胞外囊泡诱导促进神经干细胞向神经元分化的可能性。方法：（1）体外培养大鼠神经干细胞及星形胶质细胞，行细胞形态及免疫荧光鉴定，进一步提取星形胶质细胞来源细胞外囊泡，并通过透射电镜、粒径分析、Western blot等方法进行鉴定；（2）将第3代神经干细胞分2组，分别加入同体积的PBS、星形胶质细胞来源细胞外囊泡（质量浓度为1 mg/mL）干预6 d;（3）通过免疫荧光、qRT-PCR和Western blot检测星形胶质细胞来源细胞外囊泡干预后神经元标志物的表达水平。结果与结论：（1）显微镜下神经干细胞形态为球形，以细胞团状分布，免疫荧光示特征性标志物CD133、Nestin呈高表达水平；（2）显微镜下星形胶质细胞形态为不规则星状，且免疫荧光示特征性标志物胶质纤维酸性蛋白呈高表达水平；（3）星形胶质细胞来源细胞外囊泡形态近似圆形或椭圆形杯状，动态光粒子散射仪显示直径在10-200 nm之间，Western blot示细胞外囊泡相关标志物CD63及TSG101表达阳性；（4）相比PBS组，星形胶质细胞来源细胞外囊泡组可见神经干细胞大量贴壁分化，分化细胞胞体饱满，有明显突起，主要呈神经元样，且微管蛋白β3及神经丝蛋白200呈高表达（P ＜0.05）;（5）以上结果提示，星形胶质细胞来源细胞外囊泡可促进神经干细胞向神经元分化。

• 单位
  江苏大学附属医院