高效液相色谱法在脱氧核糖核酸酶解动力学研究中的应用

作者：林东翔; 吴永宏; 张业勇; 熊健; 柏建新; 应汉杰

来源：生物加工过程, 2009, (02): 63-67.

• 脱氧核苷酸
• 酶解
• 高效液相色谱
• 动力学 deoxynucleotide
• enzymolysis
• HPLC
• kinetic

为了更好地对脱氧核糖核酸酶解动力学过程进行研究,建立脱氧核糖核酸(DNA)酶解液中4种脱氧核苷酸(腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)、鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)、胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)、胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP))的高效液相测定方法,能将酶解液中4种脱氧核苷酸完全分离并准确定量。在此基础上,对DNA酶解的动力学进行初步研究,其反应机理为不存在底物和产物抑制的双底物顺序反应,动力学方程为x=1/bln(1+abt)(其中a=0.372 30ρ-0.974;b=-0.049 320ρ+1.115 30ρ-1.110 3),该方程可以很好地描述DNA酶解过程,误差仅为3.31%。

• 单位
  生命科学学院; 南京工业大学; 材料化学工程国家重点实验室