灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响

作者：丰启盈; 邓喜玲; 张杰; 董江涛; 柳小玲; 梁粟; 王菊; 张辉; 吴江东; 章乐; 吴芳^*; 张万江^*

来源：中国人兽共患病学报, 2023, 39(11): 1100-1106.

• 结核病
• 灭活疫苗
• T淋巴细胞
• 免疫记忆

目的 探讨灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响。方法 以PBS、BCG菌株、B/R菌株与灭活B/R菌株为分组方式，单次皮下接种免疫C57BL/6小鼠。于免疫后第9周、第12周和第15周，分别取各组小鼠脾脏，提取脾脏淋巴细胞。各组脾脏淋巴细胞半数直接检测，其余部分进行体外培养，并按实验设计以结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)进行刺激，而后进行检测。应用流式细胞技术分别检测未经PPD刺激和经刺激的小鼠脾脏淋巴细胞内中央型记忆性T细胞(TCM)和效应型记忆性T细胞(TEM)数量。结果 免疫后未经PPD刺激，第9周时，灭活B/R组、B/R组、BCG组诱导产生的CD4+ TCM(F=13.20,P<0.05)与CD4+ TEM(F=28.15,P<0.05)高于PBS组；诱导产生的CD8+ TCM(F=8.92,P<0.05)与CD8+ TEM(F=6.13,P<0.05)高于PBS组。第12周时，各组诱导产生的CD4+ TCM(F=15.97,P<0.05)与CD4+ TEM(F=13.60,P<0.05)高于PBS组；诱导产生的CD8+ TCM(F=5.52,P<0.05)与CD8+ TEM(F=20.15,P<0.05)高于PBS组。第15周时，各组诱导产生的CD4+ TCM(F=15.40,P<0.05)与CD4+ TEM(F=7.43,P<0.05)高于PBS组；诱导产生的CD8+ TCM(F=6.57,P<0.05)与CD8+ TEM(F=9.27,P<0.05)高于PBS组。免疫后经结核特异性抗原PPD刺激，在第9周时，灭活B/R组、B/R组、BCG组诱导产生的CD4+ TCM(F=9.66,P<0.05)与CD4+TEM(F=11.20,P<0.05)高于PBS组；诱导产生的CD8+ TCM(F=7.24,P<0.05)与CD8+ TEM(F=9.30,P<0.05)高于PBS组。第12周时，各组诱导产生的CD4+ TCM(F=9.33,P<0.05)与CD4+TEM(F=6.94,P<0.05)高于PBS组；诱导产生的CD8+ TCM(F=67.71,P<0.05)与CD8+ TEM(F=10.86,P<0.05)高于PBS组。第15周时，各组诱导产生的CD4+ TCM(F=39.88,P<0.05)与CD4+TEM(F=11.93,P<0.05)高于PBS组；诱导产生的CD8+ TCM(F=138.80,P<0.05)与CD8+ TEM(F=38.47,P<0.05)高于PBS组。值得注意的是，在第15周时，灭活B/R组与B/R组诱导产生的CD8+ TCM(q灭活B/R=12.24,qB/R=12.61,P<0.05)与CD8+ TEM(q灭活B/R=7.19,qB/R=5.00,P<0.05)均高于BCG组。结论 灭活B/R菌株免疫小鼠后，所诱导对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的能力与B/R菌株相当，热灭活未影响B/R菌株诱导小鼠免疫记忆的能力。

• 单位
  石河子大学医学院第一附属医院; 石河子大学