丙酮酸乙酯抑制脓毒症时HMGB1释放的分子机制

作者：杨超; 吴传新; 孙航; 龚建平; 刘杞

来源：中山大学学报(医学科学版), 2014, 35(02): 187-193.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2014.0031

• 高迁移率族蛋白B1
• 脓毒症
• 丙酮酸乙酯
• 分子机制

【目的】探讨丙酮酸乙酯(EP)抑制脓毒症巨噬细胞表达和释放HMGB1的相关分子机制。【方法】将小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7分为LPS和LPS+EP组,分别采用100 ng/mL LPS和100 ng/mL LPS+5 mmol/L EP刺激,于刺激后不同的时间点,Western blot检测细胞总蛋白内p-p38MAPK、CBP的含量变化以及胞质和胞核内NF-κB的含量;用免疫细胞化学、激光共聚焦显微镜观察培养细胞内p-p38MAPK、NF-κB和CBP的变化;Real-time PCR检测培养细胞HMGB1的mRNA水平,ELISA检测培养上清HMGB1的蛋白含量。【结果】LPS和LPS+EP刺激后26 h,细胞内p-p38MAPK蛋白含量逐渐增加,但LPS+EP组p-p38MAPK蛋白含量明显低于LPS组;NF-κB在细胞质内的含量逐渐减少,而在细胞核内的含量逐渐增多,而LPS+EP组NF-κB从胞质到胞核的移位明显弱于LPS组;细胞内CBP的蛋白含量逐渐增加,但LPS+EP组明显低于LPS组。随着p-p38MAPK、NF-κB和CBP等蛋白的变化,LPS和LPS+EP刺激后24、36和48 h,LPS+EP组细胞内HMGB1mRNA表达比LPS组明显减少;在LPS和LPS+EP刺激后1848h,LPS+EP组培养上清中HMGB1蛋白含量明显低于LPS组。【结论】EP通过抑制单核-巨噬细胞内的信号分子p-p38MAPK、NF-κB、和CBP的表达,从而抑制LPS诱导单核-巨噬细胞表达和释放HMGB1。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第二医院