摘要

为探究浙江舟山地区网箱养殖小黄鱼暴发的以眼球突出、眼周充血、内脏出血等为特征症状的疾病病因,本研究采集发病小黄鱼的脑及内脏病变组织制作病理切片,观察结果显示,病鱼的脑、肝、脾、肾组织损伤严重,主要表现为淤血、细胞空泡变性、散在坏死,炎性细胞浸润等病理变化。将组织碎片于常规细菌培养基(TSA)和血琼脂培养基上划线培养,进行病原分离,结果显示,从患病鱼的脑和头肾组织中均分离到同一优势菌株DB2009001。经形态学观察、生理生化鉴定、16S rRNA 基因扩增及序列分析,并结合随机扩增多态性 DNA(RAPD)分型试验及海豚链球菌 lctO 基因的检测,确定菌株 DB2009001 为 Ⅰ 型海豚链球菌。毒力基因的 PCR 检测结果显示,DB2009001 同时携带海豚链球菌的 7 种毒力基因(pgmA、scpI、simA、cpsD、sagA、pdi、cfi)。药敏试验结果显示,菌株 DB2009001 对四环素类、喹诺酮类、β 内酰胺类、氯霉素类等药物敏感,对氨基糖苷类药物不同程度耐药。动物回归试验结果显示,菌株DB2009001可感染健康小黄鱼并引起死亡,对其半数致死剂量(LD50)为1.66×103cfu/g,感染小黄鱼表现出与自然发病类似的症状,并从濒死的鱼体内再次分离到相同的菌株,表明菌株DB2009001为该养殖场小黄鱼暴发性疾病的致病菌。本研究首次报道了海豚链球菌能够感染小黄鱼,为小黄鱼链球菌病的防治提供了依据。