液滴数字聚合酶链式反应芯片及其在致病菌检测中的应用

作者：邓雪蕾; 张苑怡; 袁浩钧; 刘松生; 陈莹莹; 郜晚蕾; 周洪波; 贾春平; 赵建龙; 卞晓军

来源：分析测试学报, 2017, 36(10): 1191-1196.

• 数字PCR
• 液滴微流控芯片
• 致病菌
• 副溶血性弧菌

设计与制作了一种基于聚二甲基硅氧烷-玻璃(PDMS-Glass)的多功能集成式液滴数字聚合酶链式反应(ddPCR)芯片,该芯片由产生液滴的PDMS模块和收集液滴的玻璃腔体模块组成。PDMS模块采用双通道的T形结构设计,液滴产生速度快且通量高,在30 min内可生成2×106个直径约为20μm的微液滴。玻璃腔体模块中存储的液滴在整个实验过程中无需转移,可直接在原位PCR仪上进行扩增,每个液滴均是一个微反应器,经过多次热循环后,液滴仍能保持良好的稳定性。选用副溶血性弧菌(VP)作为食源性致病菌的研究模型,考察了ddPCR芯片对其基因组DNA的绝对定量能力,结果表明,该ddPCR芯片对VP基因组DNA绝对定量的线性范围宽,可跨越5个数量级(101106 copies/μL),定量结果与DNA理论参考浓度间有很好的相关性。

• 单位
  中国科学院上海微系统与信息技术研究所; 传感技术国家重点实验室; 农业部; 上海海洋大学