重组表达D-泛解酸内酯水解酶乳酸克鲁维酵母的发酵工艺优化

作者：谢颂洋; 顾正华; 郭自涛; 朱慧霞; 时祎; 辛瑜; 张梁

来源：食品与发酵工业, 2021, 47(23): 38-45.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027259

• D-泛解酸内酯水解酶
• 搅拌转速
• 接种量
• 分批发酵
• 补料发酵

以前期构建的重组表达D-泛解酸内酯水解酶的乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)GG799为对象,在5 L发酵罐中,基于考察pH、搅拌转速、接种量3种单因素条件对产酶的影响结果,进一步优化补料策略,初步确定了促进重组D-泛解酸内酯水解酶高效表达的补料发酵方式。单因素条件研究结果表明,当pH 6.0、搅拌转速300 r/min、接种量2%时,可以获得最高表达水平,酶活力达5.12 U/mL,较摇瓶最佳结果提高了2倍。补料发酵研究表明,当通过补料维持发酵液恒糖质量浓度为5 g/L时,酶活力可达到8.20 U/mL,较分批发酵酶活力提高了60.1%;当分批发酵结束后,以恒速5 g/h进行补料,酶活力最高可达10.70 U/mL,较恒糖补料方式酶活力提高了30.5%,较分批发酵酶活力提高了98.6%。通过分批发酵和补料分批发酵的研究,显著提高了D-泛解酸内酯水解酶的酶活力,为进一步放大生产奠定了基础。

• 单位
  江南大学; 华南理工大学