氯氰菊酯通过JNK/c-Jun信号通路诱导肝脏氧化性DNA损伤

作者：哈梅; 董志甫; 李练兵; 王丽; 刘长江^*

来源：卫生研究, 2023, 52(03): 497-505.

DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.03.026

• 氯氰菊酯
• DNA损伤
• JNK/c-Jun信号通路
• 氧化应激

目的 明确氯氰菊酯(cypermethrin, CYP)的肝脏损伤效应，探讨促分裂素丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases, MAPK)信号通路的潜在作用。方法 选取24只青春期雄性SD大鼠，使用不同剂量β-CYP(0、5、10和20 mg/kg)连续灌胃染毒31 d。苏木素-伊红染色和透射电镜分析肝脏组织形态学和超微结构变化；酶联免疫吸附法检测丙二醛(malonaldehyde, MDA)和8-羟脱氧鸟苷(8-hydroxylated deoxyguanosine, 8-OHdG)水平；免疫组织化学分析磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinase, p-JNK)表达；免疫荧光分析磷酸化组蛋白H2A.X(phospho-histone H2A.X,γ-H2A.X)表达；实时荧光定量PCR检测谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase, GPx)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)以及过氧化氢酶(catalase, CAT)基因水平；蛋白质印迹法检测GPx1、SOD2、CAT、γ-H2A.X及MAPK信号通路相关蛋白表达。结果 CYP染毒可致大鼠肝脏形态学和超微结构发生异常改变，肝窦扩张、肝板间隙形成、线粒体嵴断裂等。肝脏中抗氧化酶GPx1、GPx4、SOD1和SOD2基因表达水平降低，同时GPx1和SOD2蛋白表达受抑。与对照组相比，β-CYP高剂量染毒组GPx1和SOD2蛋白表达水平分别降低了57.9%和50.0%(P<0.05),高剂量组脂质过氧化产物MDA水平升高了56.2%(P<0.05)。肝脏MAPK信号通路中的JNK/c-Jun信号通路被激活，JNK和c-Jun蛋白磷酸化水平增强，与对照组相比，β-CYP高剂量染毒组p-JNK和p-c-Jun蛋白表达水平分别升高了47.7%和46.5%(P<0.05),但细胞外信号调节激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK,p38)信号通路不受影响。肝脏中8-OHdG水平和γ-H2A.X蛋白表达水平上升，与对照组相比，β-CYP中、高剂量染毒组γ-H2A.X蛋白表达水平分别升高了16.9%、33.9%(P<0.05)。结论 氯氰菊酯具有肝脏损伤效应，能直接引起大鼠肝脏形态学与超微结构的异常改变，还能促使肝脏氧化应激，并通过激活JNK/c-Jun信号通路诱导肝细胞氧化性DNA损伤。

• 单位
  重庆市人口和计划生育科学技术研究院; 重庆医药高等专科学校