猪轮状病毒地方株JL94株VP6基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：陈淑红; 李一经; 师东方

来源：畜牧兽医学报, 2004, (04): 443-448.

• 猪
• 轮状病毒
• VP6基因
• 克隆
• 表达
• 纯化 porcine
• rotavirus
• VP6 gene
• cloning
• expression
• purification

以猪轮状病毒地方分离株JL94株病毒核酸为模板,通过RT-PCR扩增内衣壳蛋白基因VP6cDNA,将其插入克隆载体质粒pMD18-T,并进行测序。从T载体上将VP6基因亚克隆到表达载体质粒pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并利用Ni2+金属螯合亲合层析纯化融合蛋白。结果表明,VP6基因全长1356bp,并在大肠杆菌中获得了高效表达,表达量可占菌体蛋白的26.5%,在表达的蛋白中,除45ku主要蛋白外,还有几条分子量较小的蛋白表达出来,这些融合蛋白经纯化后均具有良好的反应特异性。

• 单位
  东北农业大学