摘要
为探讨伯氏疟原虫滑动体相关蛋白40(P.berghei glideosome-associated protein 40,PbGAP40)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性,PCR扩增GAP40329-458 aa编码基因并克隆入pET32a(+)载体,IPTG诱导PbGAP40重组蛋白(rPbGAP40)表达,纯化后免疫BALB/c小鼠。采集抗-PbGAP40免疫血清,通过ELISA和Western blot方法检测抗-PbGAP40免疫血清抗体滴度和特异性,IFA检测PbGAP40蛋白在伯氏疟原虫动合子期定位情况,体外实验检测抗-PbGAP40免疫血清对动合子期原虫发育的抑制效果。结果显示,成功表达rPbGAP40,抗-PbGAP40免疫血清抗体滴度为1∶51 200;PbGAP40在合子、retort和成熟动合子表面表达。与对照组相比,抗-PbGAP40免疫血清处理组动合子生成数目下降36.5%(P<0.05),动合子转化率下降8.5%(P<0.05)。体外培养24 h后,抗-PbGAP40免疫血清处理组中61.2%的疟原虫停留在"retort"发育阶段。结果表明,PbGAP40可作为传播阻断疫苗的候选抗原。
-
单位中国医科大学; 基础医学院