响应面法优化紫球藻原生质体的制备

作者：蒲洋; 丁涓^*; 彭炜航; 孙静; 王艳华

来源：山西农业大学学报(自然科学版), 2018, 38(10): 31-36.

DOI：10.13842/j.cnki.issn1671-8151.201808012

• 紫球藻
• 原生质体制备
• 响应面分析
• 条件优化

[目的]优化紫球藻细胞原生质体制备条件。[方法]利用Box-Benhnken的中心组合实验设计,进行三因素三水平的实验设计。[结果]得到二次回归方程:Y=55.10+5.19X1-0.075X2+1.76X3-0.85X1X2-3.13X1X3-4.20X2X3-9.09X12-6.66X22-7.49X32,确定了混合酶浓度(X1)、纤维素酶和果胶酶的比例(X2)和pH(X3)三因素对紫球藻原生质体制备率(Y)的组合效应,得到了混合酶浓度2.2%、纤维素酶与果胶酶体积比2∶3、pH 7、渗透压稳定剂为0.2mol·L-1 KCl、30℃下轻微振荡、酶解6h的最优制备条件,在此条件下得到68.5%的原生质体制备率。[结论]本研究提高了紫球藻原生质体的制备率,能够满足后续基因工程和遗传育种研究的需要。

• 单位
  鲁东大学; 山东博华高效生态农业科技有限公司; 生命科学学院