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摘要
目的:观察化痰通络方含药血清对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响及其机制。方法:将20只新西兰兔随机分为化痰通络方高(HTTL-h)、中(HTTL-m)、低(HTTL-l)剂量组,雷公藤多苷组(TG组),生理盐水组(Sal组),每组4只。分离鉴定健康新生儿HUVEC,siRNA敲降VEGFR2、PLCG1以及MAPK1,并采用RT-PCR和及Western Blot检测VEGFR2、PLCG1和MAPK1 mRNA 及蛋白水平的表达。MTT法检测经VEGF诱导的HUVEC增殖情况。结果:与Sal组比较,VEGF可显著促进HUVEC增殖,而TG或HTTL-l均可显著抑制VEGF诱导的HUVEC增殖;siRNA敲降VEGFR2后,VEGF则不能促进HUVEC增殖,同时TG也失去了对HUVEC增殖的抑制能力;siRNA敲降PLCG1后,VEGF依然可以显著促进HUVEC增殖,此时TG对VEGF刺激的HUVEC增殖失去了抑制效应,但HTTL-m和HTTL-l依然对VEGF刺激的HUVEC增殖具有显著抑制效应;siRNA敲降MAPK1后,VEGF也可显著促进HUVEC增殖,TG对VEGF刺激的HUVEC增殖具有抑制效应,同时HTTL-l也对VEGF刺激的HUVEC增殖具有显著抑制效应。结论:化痰通络方含药血清对VEGF诱导的HUVEC增殖具有抑制作用。TG抑制VEGF诱导的HUVEC增殖依赖于VEGFR2和PLCG1表达,而化痰通络方对VEGF刺激的HUVEC增殖的抑制效应则不依赖VEGF/VEGFR2/PLCG1/MAPK1信号通路。
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