鸡源抗血清4型Ⅰ群禽腺病毒单链抗体文库构建及筛选

作者：高倩文; 孙举; 尹燕博^*; 徐守振^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(01): 54-58.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.01.10

• 血清4型Ⅰ群禽腺病毒
• 噬菌体展示技术
• 单链抗体文库

为构建鸡源抗血清4型Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-4)单链抗体(scFv)文库并筛选出具有高亲和力的单链抗体。本研究从FAdV-4免疫鸡的外周血淋巴细胞中提取总RNA,采用RT-PCR的方法分别扩增出鸡抗体的VH和VL基因,通过Linker接头将VH和VL基因连接成scFv,将scFv基因连接至噬菌粒载体pComb3XSS中,构建单链抗体文库,通过噬菌体展示技术筛选抗FAdV-4单链抗体,并采用Phage ELISA方法检测抗体的亲和力。结果成功构建鸡源抗FAdV-4单链抗体文库,库容量为9.5×1010 PFU/mL,通过4轮"吸附-洗脱-富集"筛选,最终鉴定出1株与FAdV-4具有较高的亲和活性的单链抗体。该研究结果为进一步研究FAdV-4抗体奠定了基础。

• 单位
  青岛农业大学