一个复合杂合变异导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析

作者：谢海啸; 张海月; 许梦洁; 邹安庆; 金艳慧; 杨丽红; 潘景业; 王明山^*

来源：中华医学遗传学杂志, 2020, 37(05).

• 凝血因子Ⅻ缺陷症
• F12基因
• 基因变异
• 凝血因子Ⅻ水平

目的检测1个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factor Ⅻ, FⅫ)缺陷症家系的基因变异, 探讨其分子致病机制。方法用DNA直接测序法对F12基因进行变异分析;在野生型pIRES2-EGFP/FⅫ表达质粒基础上, 构建变异型FⅫ表达质粒, Polyfect转染试剂瞬时转染293T细胞, 分别测定上清液中FⅫ活性(FⅫ activity, FⅫ∶C)和FⅫ抗原(FⅫ antigen, FⅫ∶Ag), 测定细胞裂解液中FⅫ∶Ag, 并用Western印迹进行验证。结果先证者F12基因第1外显子启动子区为46TT基因型, 在第13和14外显子存在g.8489G>A(p.Glu502Lys)和g.8699G>C(p.Gly542Ser)复合杂合变异。瞬时转染结果显示, FⅫ p.Glu502Lys变异体蛋白上清液中FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的28%和24%, 细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的39%;FⅫ p.Gly542Ser变异体蛋白上清液中的FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的32%和17%, 细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的59%。结论先证者F12基因型46TT, p.Glu502Lys和p.Gly542Ser复合杂合变异导致其FⅫ水平极度降低;体外表达实验证实变异蛋白p.Glu502Lys和p.Gly542Ser存在合成和分泌障碍。

• 单位
  温州医科大学附属第一医院