PMA-qPCR方法快速检测细菌性果斑病菌活菌的研究

作者：郝芳敏; 丁伟红; 马二磊; 严蕾艳; 黄芸萍; 王毓洪; 臧全宇^*

来源：浙江农业科学, 2023, 64(03): 664-669.

DOI：10.16178/j.issn.0528-9017.20220410

• 细菌性果斑病菌
• 叠氮溴化丙锭
• 活菌检测
• 快速检测

本文将叠氮溴化丙锭(PMA)与qPCR技术相结合，建立了一种适于细菌性果斑病菌株活细胞快速检测的PMA-qPCR方法。通过试验控制单因素变化，对PMA预处理反应体系中的各参数进行优化，确立了PMA终浓度为9μg·mL-1,曝光时间为8 min的PMA预处理体系，能有效抑制1.0×107 mL-1灭活死菌的扩增，对活菌的扩增没有影响。当活菌数在2.0×101～2.0×106 mL-1,qPCR反应体系中活菌数与Ct值呈线性相关(R2=0.982 7)。本文建立的PMA-qPCR方法可在一定范围内有效去除细菌性果斑病死菌的干扰，定量检测出活菌数量，研究结果可为植物细菌性果斑病的流行规律研究提供新的技术支撑，并能有效避免PCR检测实际样品可能造成的假阳性结果。

• 单位
  宁波市农业科学研究院