十种食源性致病菌的多重PCR快速检测方法

作者：张明娟; 刘明明; 余秋地; 袁磊; 王娟; 秦爱; 李根容^*

来源：食品与发酵工业, 2022, 48(17): 273-281.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.031352

• 食源性致病菌
• 多重PCR
• 快速检测
• 特异性
• 灵敏度

为建立能够同时检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌属、克罗诺杆菌属、志贺氏菌属、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7、铜绿假单胞菌、粪链球菌、产气荚膜梭菌等10种食源性致病菌的多重PCR方法，通过特异性引物的设计、引物特异性验证、引物灵敏度验证和多重PCR检测体系主要反应条件优化，建立多重PCR检测体系，并对其特异性、灵敏度以及人工感染样品应用进行评价。结果表明，建立的多重PCR检测体系可以扩增出10种食源性致病菌的特异目标条带，无非特异扩增。测序结果与目的基因序列进行比对，其序列同源性高达98%,体系灵敏度可达10-1 ng/μL。人工污染样品应用结果表明，采用多重PCR方法简单快速，仅需简单增菌，检出限可达10 CFU/mL,整个检测时间在48 h以内。建立的多重PCR检测体系特异性强、灵敏度较高，与检验机构实际检测工作联系紧密，具有推广应用价值。

• 单位
  重庆市计量质量检测研究院