BCA-TCA法快速测定烟草蛋白质的研究

作者:翟羽晨; 王万能; 项钢燎; 张潇骏; 刘钦; 唐晓莲; 戴亚; 马扩彦; 谭兰兰
来源:河南农业科学, 2017, 46(09): 156-160.
DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.09.030

摘要

为快速准确地测定烟草中的蛋白质含量,建立并优化了BCA-TCA法,即提取烟叶蛋白质的最佳体系条件为pH值7.0的0.05 mol/L PBS缓冲液、液料比40 m L/g,使用TCA沉淀蛋白质,利用差减法去除烟叶中还原性物质对BCA方法准确性的影响,从而准确测定样品的蛋白质含量。结果表明:该方法测得的烟叶样品蛋白质含量变异系数小于5%,重复性较好;样品的加标回收率为96.39%,加标回收变异系数为0.75%<2%,准确度高;BCA-TCA法和克达尔法测定值的t检验结果为t=1.554 5<t0.05,8=2.306,说明2种方法在95%的置信区间内无显著差异,但建立的BCATCA法将耗时缩短至2.53.5 h,且操作步骤简捷、所用设备简单。可见,建立的BCA-TCA法能够快速准确地测定烟草中的蛋白质含量。

  • 单位
    重庆中烟工业有限责任公司; 四川中烟工业有限责任公司; 重庆理工大学; 生物工程学院

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