TRAIL基因修饰间充质干细胞对神经胶质瘤细胞杀伤作用研究

作者：李欣; 徐立强; 米一; 苗丽; 张晨亮; 刘拥军; 刘广洋^*

来源：药物评价研究, 2021, 44(10): 2081-2087.

• 神经胶质瘤
• 间充质干细胞
• 基因修饰
• 肿瘤坏死因子相关的凋亡配体(TRAIL)

目的研究肿瘤坏死因子相关的凋亡配体(TRAIL)基因修饰间充质干细胞(TRAIL-MSCs)对神经胶质瘤细胞的杀伤作用。方法复苏冻存的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)种子库细胞,通过慢病毒转染的方法制备TRAIL-MSCs。ELISA法检测UC-MSCs、TRAIL-MSCs细胞上清中TRAIL的含量;采用CCK-8试剂盒法检测重组TRAIL蛋白(rTRAIL,0、 25、 50、 100、 200、 400 ng/mL)对U87MG、 U251细胞的增殖抑制情况;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测U87MG、U251细胞中死亡受体DR4、DR5 mRNA表达水平,比较2种细胞对TRAIL的敏感性;将U87MG、U251细胞分别分为对照组、 UC-MSCs培养上清(阴性对照)组、 TRAIL-MSCs培养上清(含TRAIL约100 ng/mL)组和rTRAIL(100 ng/mL)组,CCK-8法检测细胞增殖抑制率;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测DR4、DR5 mRNA表达水平。结果 TRAIL-MSCs培养上清中TRAIL表达量显著高于UC-MSCs(P<0.01);rTRAIL对U87MG细胞的半数抑制浓度(IC50)为162 ng/mL,而对U251细胞的IC50大于800 ng/mL,U87MG对TRAIL的敏感性更高,差异显著(P<0.01);U87MG细胞DR4、DR5 mRNA相对表达量均显著高于U251细胞(P<0.01);与对照组比较,TRAIL-MSCs培养上清、rTRAIL对U87MG、U251细胞均有显著增殖抑制及促进凋亡的作用(P<0.05、0.01),TRAIL-MSCs培养上清作用效果显著优于rTRAIL(P<0.01);与U251相比,U87MG对TRAIL-MSCs培养上清的敏感性更强;TRAIL-MSCs培养上清处理的U87MG细胞DR4、DR5 mRNA表达量显著降低(P<0.01)。结论 TRAIL-MSCs对神经胶质瘤细胞有显著增殖抑制和杀伤作用,其功能可能与其受体DR4及DR5有关。