pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl及pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl T3151突变质粒真核表达载体的构建

作者：李瑗春; 茹懿; 王秦豪; 李霞; 白庆咸

来源：现代生物医学进展, 2013, (08): 1408-1411+1455.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2013.08.001

• pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl
• pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl T3151突变质粒
• 重组质粒
• CML
• 分段PCR IFN-β
• EPCs
• SPC-A1 cell
• Tumor Angiogenesis

目的:将Bcr-Abl及Bcr-Abl T3151突变克隆入pcDNA3.1(-)真核表达载体,为研究靶向降解受体型酪氨酸激酶BCR-Abl,抑制肿瘤细胞生长提供研究基础。方法:pcDNA3.1(-)-Bcr-Abl质粒构建:分别设计引物,通过分段PCR将BCR-ABL克隆入pcDNA3.1(-)。首先通过PCR扩增出Bcr-a片段,将其克隆入pcDNA3.1(-)的NheI/XhoI之间;接着将PCR扩增出的Abl-c片段克隆入KpnI/HindIII之间,最后XhoI/KpnI双酶切pGD210,将酶切下片段插入pcDNA3.1(-)的相应位点即可。酶切鉴定及测序正确后,转染293T细胞,...

• 单位
  第四军医大学; 西京医院