自噬体调控对巨噬细胞粘附与迁移功能的影响

作者：姜彧滕; 赵宇; 朱小东; 刘玉秋; 郭银凤; 吴贝贝; 张晓良^*

来源：巴楚医学, 2018, 1(03): 6-12.

• 巨噬细胞
• 高糖
• 自噬体
• 粘附
• 迁移

目的:本研究通过调节巨噬细胞自噬体生成探究其对巨噬细胞黏附及迁移功能的影响,以降低糖尿病肾病(DN)巨噬细胞浸润。方法:体内实验,12w末处死SD正常大鼠和DN组大鼠,病理染色观察肾脏病理改变,检测肾组织巨噬细胞标志物及自噬相关标志物表达。体外实验,检测正常与高糖(HG)组条件下,RAW 264.7巨噬细胞自噬体数量变化,自噬相关标志物LC3和Beclin-1、自噬体清除指标P62的表达,以及巨噬细胞粘附和迁移数量。分别加用自噬体生成激活剂雷帕霉素(RAPA),自噬体生成抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),观察其对巨噬细胞自噬标记物表达及其粘附和迁移功能的影响,电镜观察巨噬细胞自噬体数量的变化。结果:体内实验,DN大鼠肾损伤严重,肾组织巨噬细胞标志物CD68表达增加,LC3表达减少,P62表达增加(P<0.05)。体外实验,电镜观察发现HG组自噬体数量减少,Western与免疫荧光显示自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达降低,P62表达升高(P<0.05);3-MA组自噬体数量减少,Western与免疫荧光显示LC3和Beclin-1表达降低(P<0.05);HG组和3-MA组巨噬细胞粘附和迁移数量增多(P<0.05);电镜观察RAPA增加巨噬细胞自噬体数量,Western与免疫荧光显示RAPA提高了被HG抑制的巨噬细胞自噬水平(P<0.05),减少HG诱导的巨噬细胞黏附和迁移数量(P<0.05)。结论:HG抑制自噬水平,促进巨噬细胞黏附迁移;激活自噬体生成能提高自噬水平,减轻巨噬细胞粘附和迁移;减少自噬体生成可降低自噬水平,促进巨噬细胞粘附和迁移。

• 单位
  东南大学附属中大医院; 东南大学