O型泛亚谱系口蹄疫病毒cDNA感染性克隆的建立

作者：杨德成; 涂亚斌; 王海伟; 周国辉; 于力

来源：中国预防兽医学报, 2009, (01): 1-5+15.

• 口蹄疫病毒
• 全长cDNA
• 转录和转染
• 病毒拯救 foot-and-mouth disease virus
• full-length cDNA
• transcription and transfection
• virus rescue

本研究采用RT-PCR技术将O型口蹄疫病毒(FMDV)O/YS/CHA/05株全长基因组分4个cDNA片段进行克隆、拼接,构建了具有感染性的FMDV cDNA克隆pOKT7-O/YS/CHA/05。将线性化的pOKT7-O/YS/CHA/05在细胞外转录获得的病毒RNA转染BHK-21细胞,经培养可见典型的细胞病变(CPE)。同时,将线性化的pOKT7-O/YS/CHA/05与含有编码T7 RNA聚合酶的真核表达重组质粒共转染BHK-21细胞,同样也观察到典型的CPE。对拯救的病毒进行RT-PCR扩增、酶切和序列分析鉴定表明,拯救病毒含有不同于亲本病毒的分子标记,即在病毒核酸的3510位人工消...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所