包虫囊液体外诱导小鼠脾脏淋巴细胞TLR2和IDO表达的实验研究

作者：冯凯; 高飞; 马钰涛; 郁邦兴; 李亮; 郭保平; 单骄宇^*

来源：中国病原生物学杂志, 2020, 15(06): 649-660.

DOI：10.13350/j.cjpb.200606

• 包虫囊液
• 脾脏淋巴细胞
• Toll样受体2
• 吲哚胺2,3-双加氧酶
• 免疫逃避

目的研究细粒棘球蚴囊液对体外培养小鼠脾脏淋巴细胞TLR2和IDO表达的影响。方法制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,接种于24孔培养板中进行培养,用不同浓度比的包虫囊液(1∶10、1∶100)进行干预。分别在干预后12、24、36 h收集2份细胞及1份细胞培养上清,一份细胞用于Trizol法提取总RNA,通过实时荧光定量PCR检测TLR2、IDO、IL-5的mRNA相对表达水平,另一份细胞采用Western blot方法检测TLR2、IDO蛋白。细胞上清中的IL-6、TGF-β含量采用ELISA法检测。对小鼠脾脏淋巴细胞中IDO与TLR2 mRNA的表达进行线性相关分析。结果实时荧光定量PCR检测HCF为1∶10、1∶100时均可上调小鼠脾脏淋巴细胞TLR2、IDO、IL-5 mRNA的表达,其中1∶100稀释的HCF在24h时分别为0.282±0.144、0.218±0.036、0.648±0.148,与对照组0.006±0.003、0.002±0.000、0.008±0.001比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot检测TLR2和IDO的表达均可被HCF上调,且在低浓度HCF(1∶100)上调更为显著;ELISA检测HCF干预24 h后细胞上清中的IL-6、TGF-β含量升高,其中在HCF1∶100时,相应含量分别为(296.495±12.495)pg/ml和(449.700±5.350)pg/ml,与对照组(67.328±5.839)pg/ml和(324.200±8.065)pg/ml比较差异均有统计学意义(P<0.05)。线性相关分析显示,小鼠脾脏淋巴细胞IDO与TLR2 mRNA表达水平呈正相关(R2=0.9887,P<0.01)。结论包虫囊液对小鼠脾脏淋巴细胞TLR2和IDO的表达具有上调作用,故认为在CE慢性感染过程中TLR2和IDO共同发生负性免疫调控作用以促进Th2型反应,导致包虫感染过程中的免疫逃避。

• 单位
  基础医学院; 第二临床医学院; 新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院