摘要
目的 :探讨基因工程药物CNB通过线粒体途径引起肿瘤细胞凋亡的机制。方法 :本研究采用MTT比色法检测细胞存活和生长、流式检测细胞凋亡测定CNB对肿瘤细胞的杀伤效果;采用高内涵分析与成像仪检测细胞线粒体膜电势,以判断加入CNB后线粒体膜电势的变化情况等。结果 :在体外CNB能够有效的抑制Hep G2细胞的增殖。CNB对Hep G2细胞的抑制具有浓度依赖效应,浓度越高,抑制率相对越高。MTT实验证明,在体外CNB能够有效抑制肿瘤细胞的增殖;不同批次的CNB均具有同样的作用,能够抑制肿瘤细胞的增殖。但不同批次的CNB效果不同;CNB有浓度梯度效应,随着CNB浓度增加,能明显上调肿瘤细胞晚期凋亡的比例,当浓度达到700ug/ml时和抗肿瘤药品五氟尿嘧啶效果基本相同,说明CNB能促进肿瘤细胞凋亡;3种细胞加入CNB后均Caspase3表现为下调,说明Caspase3剪切体上调,Caspase3蛋白被激活,显示CNB能促进细胞凋亡;CNB能够定位到线粒体,导致线粒体膜通透性增加,从而引发线粒体介导的凋亡。结论 :CNB能够抑制肿瘤细胞增殖;CNB能够促进肿瘤细胞凋亡;CNB可促进线粒体途径的细胞凋亡。
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单位北京师范大学; 川北医学院附属医院; 生命科学学院