MicroRNA-124通过调控PTEN促进脑缺血损伤小鼠神经轴突生长和运动功能恢复

作者：张敬炟; 戴舒惠^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(14): 1478-1485.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202202025

• miR-124
• PTEN
• 脑缺血损伤
• 神经元轴突
• 运动功能

目的 探究MicroRNA-124(miR-124)对脑缺血损伤小鼠神经功能的改善作用及其内在机制。方法 (1)取32只C57小鼠随机分为假手术组和脑缺血组(n=16),TTC染色和神经行为学评分检测小鼠脑损伤后3天脑梗死面积和运动情况，RT-qPCR检测miR-124在两组间的表达变化。(2)培养原代神经元细胞，通过氧糖剥夺模拟缺血再灌注损伤，观察氧糖剥夺后0、72 h miR-124的变化趋势。(3)另取32只C57小鼠随机分为脑缺血组和脑缺血+miR-124组(n=16),TTC染色、转棒实验和肢体放置实验检测小鼠的运动功能改善情况。(4)细胞实验分为氧糖剥夺组和氧糖剥夺+miR-124组，通过免疫荧光实验检测两组神经元轴突的生长情况。Targetscan数据库预测miR-124下游靶基因，双荧光素酶基因报告和Western blot在原代神经元等上验证对照组和miR-124组下游靶基因第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(the phosphate and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)的表达变化。上调PTEN,检测氧糖剥夺+miR-124和氧糖剥夺+miR-124+PTEN两组神经元轴突的生长情况。(5)在体实验中检测脑缺血+miR-124组和脑缺血+miR-124+Pten组(n=8)转棒实验和肢体放置情况。结果 脑缺血再灌注后，小鼠脑梗死面积约达到40%(P<0.001),小鼠的神经认知功能显著降低(P<0.001),已达到重度认知功能损害；miR-124的表达较对照组明显升高(P<0.05);而进一步过表达miR-124能够促进氧糖剥夺后神经元轴突的生长(P<0.05),显著缩小脑梗死面积(P<0.05),且促进动物运动能力的恢复和改善(P<0.05);Targetscan数据库预测miR-124下游靶基因为PTEN,双荧光素酶基因报告和Western blot都证实miR-124能有效下调PTEN的表达(P<0.05);最后，上调PTEN逆转了miR-124促进神经元轴突的生长以及改善小鼠运动能力的效应(P<0.05)。结论 miR-124通过下调PTEN促进脑缺血小鼠神经元轴突生长，且有助于小鼠运动功能的恢复。

• 单位
  海南医学院; 中国人民解放军空军军医大学; 公共卫生学院; 西京医院