幽门螺杆菌Tipα蛋白的表达、纯化及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

作者：李杰; 陈国栋; 曾莎莎; 肖灵巧; 韩亮; 张洁雅; 段洁; 张艳^*

来源：中国病原生物学杂志, 2019, 14(09): 1024-1028.

DOI：10.13350/j.cjpb.190908

• 幽门螺杆菌
• Tipα蛋白
• IL-6/STAT3信号通路
• 胃癌
• 增殖
• 迁移

目的表达并纯化重组幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)肿瘤坏死因子-α诱导蛋白(tumor necrosis factor-α-inducing protein,Tipα),观察其对胃癌细胞增殖和迁移的影响以及IL-6/STAT3信号通路在其中的作用。方法采用IPTG诱导表达Tipα重组蛋白并通过Ni2+亲和层析纯化,纯化产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;使用重组Tipα蛋白刺激胃癌SGC7901细胞,分别采用CCK8、流式细胞术、划痕伤口愈合试验和Transwell试验检测其对细胞增殖、凋亡和迁移的影响。结果可溶性25×103重组Tipα蛋白被成功诱导表达且能被抗His-tag单克隆抗体所识别。与空白对照组相比,Tipα蛋白能够抑制SGC7901细胞凋亡(t=9.53;P<0.05)。与PBS组相比,Tipα组细胞的增殖和迁移能力增加,而IL-6单克隆抗体或STAT3抑制剂SH-4-54预处理能够减弱Tipα诱导的细胞增殖和迁移(CCK8实验,F=103.194,P<0.01;划痕伤口愈合试验,F=15.568,P<0.01;Transwell试验,F=36.017,P<0.01)。结论 Hp Tipα蛋白可促进胃癌细胞增殖和迁移,IL-6/STAT3信号通路在其中发挥重要作用。

• 单位
  南华大学; 永州职业技术学院; 生物化学教研室