高产量非达霉素工程菌的构建及其发酵优化

作者：许睿; 高萍; 闵涛玲; 陈昌发; ***^*

来源：中国医药工业杂志, 2020, 51(02): 204-210.

DOI：10.16522/j.cnki.cjph.2020.02.010

• 非达霉素
• 正调控基因
• 工程菌
• 发酵优化

本试验将橙色指包囊菌(Dactylosporangium aurantiacum)NRRL 18085中的非达霉素生物合成基因簇与本实验室保存的德干高原游动放线菌(Actinoplanes deccanensis) SIPI-XR01的测序结果进行对比,找到SIPI-XR01中含有与已报道的合成基因簇中编码LuxR家族调节因子的转录激活因子tiaR1基因类似的基因片段,并将其命名为xrr1,根据该基因设计引物,并通过PCR扩增和质粒构建的方法将其整合到菌株基因组上,成功构建了过量表达xrr1工程菌,命名为SIPIXR02。结果表明SIPI-XR02相比SIPI-XR01产量有明显提高,经过培养基碳氮源优化后摇瓶产量最高可达4592μg/ml,并随后在10 L发酵罐上进行验证,发酵后产量达到3 930μg/ml,具有工业应用价值。

• 单位
  中国医药工业研究总院