金黄色葡萄球菌Hfq蛋白体外聚体生成和生物学功能的研究

作者：刘玉; 吴娜; 高亚萍; 董洁; 杨光; 邵宁生

来源：军事医学科学院院刊, 2009, (01): 24-28.

• 葡萄球菌
• 金黄色
• Hfq蛋白
• 聚体形式
• RNA伴侣 Staphylococcus aureus
• Hfq
• polymer
• RNA chaperone

目的:研究金黄色葡萄球菌中Hfq蛋白的聚体形式以及聚体和单体的不同生物学功能。方法:利用pET28-(a)载体克隆表达金葡菌来源的Hfq蛋白,通过天然凝胶电泳和SDS-PAGE检测不同条件下Hfq蛋白的存在形式。通过点突变的方法获得56和63位突变的Hfq蛋白,利用凝胶阻滞试验检测单体和聚体的RNA结合活性。结果:Hfq蛋白以单体、二聚体、四聚体以及六聚体的形式存在,各种聚体比例不同,长时间的高温、强酸和强碱会影响聚体的稳定性。在常规SDS-PAGE条件下,重组蛋白仅以四聚体形式存在。突变体蛋白不能够形成聚体且只有形成聚体的Hfq蛋白才能特异结合RNA。结论:Hfq蛋白形成聚体的过程是二聚体四...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所