miR-30c/YWHAZ轴对胰腺癌细胞耐药性的影响

作者：王金^*; 康湧; 张玮; 刘振

来源：中华内分泌外科杂志, 2022, 16(05): 605-610.

• 微小RNA-30c
• 胰腺癌细胞
• 耐药性
• 吉西他滨

目的探讨微小RNA-30c(miR-30c)是否通过靶向酪氨酸3-单加氧酶/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白zeta多肽(YWHAZ)介导胰腺癌细胞对吉西他滨(gemcitabine, Gb)耐药性的作用。方法用RT-qPCR法筛选出人胰腺癌细胞系中miR-30c表达最低的SW1990细胞株, 并建立吉西他滨耐药细胞株SW1990/吉西他滨, 设置为SW1990/吉西他滨组(未转染)、miR-30c过表达(Ad-miR-30c)组、Ad-miR-30c阴性对照(Ad-eGFP)组、SW1990组。RT-qPCR法检测miR-30c水平;CCK-8法测细胞半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(IR);Western blot法检测耐药相关蛋白P-gp、凋亡相关蛋白Caspase-1、迁徙转移相关蛋白MMP-9、YWHAZ蛋白及下游通路-激酶丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)/细胞外调节蛋白激酶1(ERK1)蛋白表达。共转染Ad-miR-30c及YWHAZ过表达腺病毒(Ad-YWHAZ), Western blot法测细胞P-gp及YWHAZ通路相关蛋白表达。结果 SW1990/吉西他滨耐药细胞的IC50[(59.16±5.14)nmol/L]及IR(11.15±0.19)、YWHAZ蛋白(1.59±0.15)、P-gp(2.43±0.26)表达升高, miR-30c(0.25±0.02)表达降低(P<0.05), p38MAPK/ERK通路处于活化状态。上调SW1990/吉西他滨细胞中miR-30c(1.59±0.15)表达后, 细胞的IC50[(25.14±2.15)nmol/L)及IR(5.48±0.12)、YWHAZ(1.49±0.13)、P-gp(1.46±0.10)降低(P<0.05), p38MAPK/ERK通路处于活化状态。上调YWHAZ表达, 可逆转Ad-miR-30c的上述作用(P<0.05)。结论胰腺癌耐吉西他滨细胞株中miR-30c表达降低, 上调miR-30c表达可靶向抑制YWHAZ/p38MAPK/ERK途径, 并抑制耐药蛋白P-gp表达, 降低胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药性。

• 单位
  山西医科大学第一医院