摘要
目的 探讨内质网膜蛋白复合物亚单位6(EMC6)调控细胞增殖和凋亡对宫颈癌Hela细胞放射线敏感性的影响。方法 将宫颈癌Hela细胞分为CON组(正常宫颈癌Hela细胞)、shCtrl组(EMC6基因空白质粒转染宫颈癌Hela细胞)和shEMC6组(EMC6基因短发夹RNA干扰表达质粒转染宫颈癌Hela细胞),给予2、4、6、8 Gy X线外照射处理,照射处理后采用定量聚合酶链反应法检测EMC6 mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测EMC6蛋白表达水平,克隆形成实验检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平和细胞周期。结果 shEMC6组EMC6 mRNA表达水平低于shCtrl组[(0.530±0.017)比(1.004±0.108)](P=0.002),EMC6的敲减率为47.24%。shEMC6组EMC6蛋白表达水平低于shCtrl组[(0.506±0.012)比(0.528±0.005)](P=0.023)。2、4 Gy X线照射处理后,shEMC6组细胞增殖水平均低于shCtrl组和CON组(均P<0.05)。2 Gy X线照射后4、8、12 h, shEMC6组细胞凋亡率均高于shCtrl组[(45.71±0.66)%比(34.86±1.16)%、(13.85±0.24)%比(12.85±0.19)%、(22.74±0.14)%比(17.77±0.40)%],差异均有统计学意义(均P<0.05)。2 Gy X线照射前0 h, shEMC6组S期细胞比例低于shCtrl组,G2期细胞比例高于shCtrl组(均P<0.05);照射后4 h, shEMC6组S期细胞比例低于shCtrl组(P<0.05),G2期细胞比例与shCtrl组比较差异无统计学意义(P>0.05);照射后8 h, shEMC6组S期细胞比例高于shCtrl组,G2期细胞比例低于shCtrl组(均P<0.05);照射后12 h, shEMC6组S期细胞比例与shCtrl组比较差异无统计学意义(P>0.05),G2期细胞比例低于shCtrl组(P<0.05)。结论 宫颈癌Hela细胞沉默EMC6后,细胞增殖减少,同时细胞凋亡和G2期细胞数量显著增加,对放射线的敏感性显著提高。
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单位新疆医科大学附属肿瘤医院