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摘要
环糊精是一种环状多糖，可用于改变某些大分子化合物的理化性质，在食品、生物及医药等领域都具有很高的工业应用前景。通过利用β-环糊精葡萄糖基转移酶（β-CGTase），使其作用于淀粉等含有葡萄糖基的多糖化合物，可转化生成β-环糊精。该研究采用易错PCR技术对来源于Paenibacillus campinasensis的β-CGTase进行定向进化，得到酶活力高的突变体，并对突变体进行镍柱亲和纯化与酶学性质分析。实验最终获得了一株突变体Q280L，其酶活力与原始β-CGTase相比提高了42.10%，对β-环糊精的转化率提高了7.60%，最适反应p H值和稳定性均有所变化，底物亲和力提高46.13%。经序列比对及结构分析，发现突变体Q280L与野生β-CGTase相比，第280位氨基酸残基种类以及周围氢键发生变化。该试验结果表明，基于易错PCR技术对β-CGTase基因进行定向进化，可提高酶活力和改善酶学性质，为实现β-环糊精的工业生产提供参考意义。
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