阳离子通道阻断剂-钌红促进破骨细胞分化的影响

作者:糜宝国; 关邯峰; 吴巍; 李勇; 谭鹏; 李锋
来源:中华实验外科杂志, 2013, (04): 784-786.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2013.04.044

摘要

目的探讨阳离子通道阻断剂钌红对破骨细胞分化的影响及其机制。方法钌红处理Raw246.7后,50μg/L核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导6 d,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP~+(核≥3)细胞的形成;TRAP试剂盒检测细胞中TRAP酶的活性;实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测破骨细胞特异性标志基因TRAP、组织蛋白酶K(CK)和金属基质蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达量;RT-qPCR、Western blot分别检测核因子-κB受体活化因子(RANK)在mRNA和蛋白水平上的表达。结果钌红促进RANKL诱导Raw246.7细胞形成TRAP阳性多核细胞,对照组TRAP吸光度(A)值为0.33±0.04,而钌红组TRAP 4值为0.43±0.03;同时也上调了破骨细胞标志性基因TRAP、CK和MMP-9的mRNA表达以及RANK在mRNA和蛋白水平的表达。各指标在两组中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论钌红促进Raw246.7向破骨细胞分化,这一过程与钌红上调RANK表达有关,即与RANK-RANKL轴相关。

全文