大鼠脊髓损伤后β淀粉样蛋白的表达及γ分泌酶抑制剂对其作用机制的影响

作者：郭磊; 侯景明; 钟剑峰; 刘佳; 孟繁星; 陈杨葭; 冯杰扬; 焦皎; 孙天胜

来源：解放军医学院学报, 2016, 37(04): 371-376.

• 脊髓损伤
• β淀粉样蛋白
• 轴突生长抑制因子受体
• Rho相关激酶
• 大鼠

目的探讨β淀粉样蛋白(amyloidβ,Aβ)在大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后的表达变化及γ分泌酶抑制剂DAPT对其作用机制的影响。方法选用雌性SD大鼠117只,随机分成3组:假手术组(Sham组,31只)、脊髓损伤组(SCI组,43只)、干预组(DAPT组,43只),采用Allen’s打击法制作大鼠脊髓损伤模型,DAPT组于造模前及术后给予DAPT药物溶液胃管灌注,并于术后6 h、1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d取血液、脑脊液及损伤段脊髓组织,分别行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和脑脊液Aβ水平,免疫印迹法(Western blot)检测脊髓组织淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、β淀粉样蛋白、轴突生长抑制因子受体(neurite growth inhibitor receptor 1,Ng R1)、Rho相关激酶2(Rho related kinase 2,Rock2)蛋白水平,免疫组化分析观察Aβ表达并计数阳性细胞,采用BBB评分评估大鼠后肢运动功能恢复情况。结果 SCI组大鼠Aβ水平明显高于Sham组(P<0.05),血清和脑脊液中Aβ水平在SCI后6 h开始升高,3 d时达到高峰,7 d时降至正常水平,应用DAPT能够明显降低SCI后Aβ水平(P<0.05);脊髓损伤后3 d SCI组Aβ、Ng R1、Rock2蛋白水平较Sham组明显升高(P<0.05),DAPT组Aβ、Ng R1、Rock2蛋白水平较SCI组明显降低(P<0.05);免疫组化分析可见损伤区脊髓Aβ阳性细胞明显增多,DAPT组Aβ阳性细胞数明显少于SCI组(P<0.05);DAPT组大鼠BBB评分明显高于SCI组(P<0.05);SCI大鼠血清和脑脊液Aβ水平与运动功能BBB评分呈负相关(P<0.05)。结论大鼠SCI后Aβ表达上调,通过应用γ分泌酶抑制剂DAPT减少Aβ表达能够促进运动功能恢复,其机制可能是通过下调Ng R1蛋白表达、抑制Rho/Rock通路激活,从而减少白质区髓鞘结构损伤。

• 单位
  北京军区总医院; 第三军医大学; 西南医院