摘要

目的探讨姜黄素对系统性红斑狼疮(SLE)患者外泌体刺激后巨噬细胞吞噬能力的影响。方法选取2016年2月至2017年11月广州市皮肤病防治所和中山大学孙逸仙纪念医院诊治的活动期SLE患者18例, 健康对照18例。提取受试者血清外泌体, 分为健康对照者外泌体(CON-exo)、SLE患者外泌体(SLE-exo)、CON-exo +姜黄素、SLE-exo +姜黄素用于刺激THP-1源性巨噬细胞, pHrodo?Red指示剂与巨噬细胞共孵育, 流式细胞仪检测平均荧光强度, 免疫荧光染色计算pHrodo? Red阳性细胞比例, 评价巨噬细胞吞噬功能。Western印迹法检测CON-exo组、SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素(浓度分别为1、5、20 μmol/L)组CD14蛋白水平。两组比较使用Student-t检验, 多组间对比采用单因素方差分析, 两两比较采用LSD-t检验。结果流式细胞仪检测显示, CON-exo组、CON-exo +姜黄素组、SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素组相对荧光强度分别为101.3% ± 14.05%、94.27 ± 14.13%、41.02% ± 9.54%、87.33% ± 15.01%, 差异有统计学意义(F = 10.81, P < 0.01);免疫荧光染色pHrodo检测显示, 阳性细胞比例分别为82.16% ± 5.20%、81.33% ± 4.51%、54.20% ± 9.31%、71.23% ± 5.43%, 差异有统计学意义(F = 12.42, P < 0.01), SLE-exo组巨噬细胞荧光强度、阳性细胞比例均低于CON-exo组(t值分别为5.26、5.35, 均P < 0.01)和SLE-exo +姜黄素组(t值分别为3.97、3.26, 均P < 0.05)。Western印迹法显示, CON-exo组、SLE-exo组、SLE-exo +姜黄素(浓度分别为1、5、20 μmol/L)组细胞CD14蛋白水平分别为96.33% ± 13.65%、30.67% ± 5.86%、45.24% ± 8.89%、72.81% ± 6.62%、90.67% ± 12.66%, 差异有统计学意义(F = 24.57, P < 0.01), SLE-exo组低于Con-exo组(t = 8.06, P < 0.001)和SLE-exo +姜黄素(5、20 μmol/L)(t值分别为5.08、7.38, 均P < 0.001), 随着姜黄素剂量增加, CD14水平有升高的趋势。结论 SLE患者外泌体明显抑制巨噬细胞吞噬功能, 而姜黄素可逆转SLE患者外泌体的作用。