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摘要
目的构建结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达载体。方法 PCR技术扩增获得rpoB基因,连接入pB luescriptⅡSK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将rpoB基因定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-rpoB,将pQE-Tri-rpoB转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染P815细胞后,以RT-PCR方法检测mRNA表达。结果构建了重组质粒pQE-Tri-rpoB,RT-PCR结果证明rpoB可在P815细胞中转录。结论成功构建了结核分支...
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