摘要
目的探讨胃癌组织中是否存在胃泌素/胆囊收缩素(CCK)-B受体自分泌环及其在胃癌的发生发展中的作用。方法采用人胃癌细胞系SGC-7901在含10%新生小牛血清RPMI-1640培养基中培养于37℃、5%CO2的培养箱中。SGC-7901细胞中胃泌素/CCK-B受体自分泌环的检测分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学及放射免疫分析法。抗胃泌素单克隆抗体阻断自分泌环对细胞生长与凋亡的影响采用SGC-7901细胞与不同浓度的抗胃泌素单克隆抗体共同孵育72 h后,搜集细胞,分别用四甲基偶氮唑盐比色法及流式细胞术检测细胞生长率、细胞周期及凋亡细胞,以不加抗体孵育作为阴性对照。结果SGC-7901细胞复合表达CCK-B受体和胃泌素基因,其序列已被测序证实。胃泌素蛋白主要在SGC-7901细胞的胞质中表达,且培养液中的胃泌素浓度随培养时间的延长和细胞数的增加而增加。用抗胃泌素单克隆抗体阻断此自分泌环后,细胞的生长率从正常对照的100%降至31.4%(抗体浓度为2μg/ml),而S期细胞数从正常对照的27.8%降至9.5%(抗体浓度为1.2μg/ml),且细胞凋亡率分别从正常对照的0.9%(亚G1峰法)和1.1%(膜联蛋白- V/碘化丙啶双染法)升至6.5%(亚G,峰法)和7.5%(膜联蛋白-V/碘化丙啶双染法)。结论胃癌细胞系SGC-7901中存在胃泌素/CCK-B受体自分泌环,阻断此自分泌环后能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。
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单位贵阳医学院附属医院; 贵州医科大学