携带绿色荧光蛋白的外源性胶质纤维酸性蛋白基因稳定转染对胶质瘤细胞分化及增殖的影响

作者：赵雯; 卞修武; 史景泉; 蒋雪峰

来源：中华病理学杂志, 2004, (05): 52-56.

• 神经胶质瘤
• 神经胶质原纤维酸性蛋白质
• 基因表达
• 发光蛋白质类

目的　观察增强胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)基因表达对恶性胶质瘤细胞生物学特性的影响 ,为胶质瘤诱导分化及基因治疗研究提供理论基础。方法　构建携带 1 1kb的GFAPcDNA和绿色荧光蛋白 (GFP)基因的真核表达载体 ,采用脂质体转染法将其导入人恶性胶质瘤细胞系SHG 4 4 ,G4 18结合荧光动态监测筛选阳性克隆 ;采用原位杂交、免疫细胞化学及Western蛋白印迹等方法检测GFAP基因及其蛋白表达 ;并通过形态学、细胞生长曲线、软琼脂克隆形成及流式细胞分析等观察GFAP基因对胶质瘤细胞形态、增殖和细胞周期的影响。结果　转染阳性的SHG 4 4细胞GFAPmRNA及其蛋白表达增强 ,瘤细胞形态趋向成熟 ,突起增多变细 ,细胞增殖速度减缓 ,G0 /G1期、G2 /M期细胞比例降低。结论　增强GFAP基因表达可显著抑制胶质瘤细胞增殖并诱导其分化成熟 ,提示通过基因治疗策略或诱导分化方法上调GFAP基因表达是恶性胶质瘤治疗的新途径

• 单位
  第三军医大学西南医院