日本血吸虫成虫抗原通过ROS诱导人LX-2肝星状细胞NLRP3炎症小体活化和胶原表达

作者：朱燕楠; 缪婷婷; 王伟; 陆忠奎; 刘劲峰; 王勇^*

来源：寄生虫与医学昆虫学报, 2018, 25(02): 71-79.

DOI：10.3969/j.issn.1005?0507.2018.02.002

• LX-2细胞
• SWA
• NLRP3炎症小体
• ROS
• 肝纤维化

为了探讨日本血吸虫成虫抗原(SWA)对LX-2细胞NLRP3炎症小体活化和纤维化相关基因表达的影响,以及活性氧(ROS)在其中的作用,本文首先采用不同浓度(0、25、50、100μg/m L)的SWA刺激LX-2细胞,通过实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和Western blot检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的基因和蛋白表达, ELISA检测细胞IL-1β的分泌水平;同时使用CCK-8 (Cell Counting Kit-8)法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞LDH的释放;流式细胞术检测SWA刺激对LX-2细胞中ROS产生的影响;之后使用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)处理细胞,检测NLRP3、IL-1β、Caspase-1、α-SMA、ColⅠ基因和蛋白的表达水平。结果显示,当SWA的浓度达100μg/m L时,LX-2细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的m RNA的表达与对照组相比均明显升高,同时相关蛋白的表达和IL-1β的分泌也显著升高。流式检测结果显示,SWA刺激LX-2细胞后能显著增加细胞内ROS的生成,并在NAC处理后,可见明显抑制细胞内ColⅠ和炎症小体活化相关的基因和蛋白的表达。结果提示,SWA可以诱导LX-2细胞内炎症小体活化和胶原表达,并且ROS反应可能在介导NLRP3活化中发挥重要的作用。

• 单位
  基础医学院; 南京医科大学