干扰RNA抑制小鼠视网膜HIF-1α蛋白质的表达

作者：熊宇; 夏晓波; 许惠卓; 蒋剑; 宋伟涛; 刘双珍; 许雪亮

来源：国际眼科杂志, 2007, (02): 361-364.

DOI：10.3969/j.issn.1672-5123.2007.02.021

• 小干扰RNA
• 缺氧诱导因子-1α 视网膜新生血管
• 基因治疗

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)特异性小片段干扰性RNA(siRNA)对小鼠视网膜HIF-1α蛋白质的抑制作用。方法:构建HIF-1α siRNA重组质粒pSUPERsiHIF-1α。选择7d龄C57BL/6J小鼠24只,其中6只为正常组(A);另18只建立缺氧诱导的视网膜新生血管模型,并随机分为:对照组(B)、空载体组(C组)和基因治疗组(D组),每组6只。于出舱前1d,向空载体组小鼠玻璃体腔注射pSUPER空载体质粒;基因治疗组注射HIF-1αsiRNA重组质粒pSUPERsiHIF-1α。采用FITC-Dextran荧光造影视网膜铺片观察4组小鼠视网膜血管形态变化;SP免疫组织化学检测各组间HIF-1α的表达差异。结果:荧光造影视网膜铺片显示,A组整个视网膜血管分布呈均匀网状;B、C组视网膜中周部可见大片无灌注区,见新生血管丛,伴荧光渗漏;D组无灌注区较B,C组明显减少,周边部毛细血管网基本正常,新生血管丛明显减少。免疫组织化学染色显示,A组HIF-1α蛋白表达阴性;B,C组在神经节细胞层呈阳性表达;D组在神经节细胞层呈弱阳性表达,较B,C组明显减少。结论:采用玻璃体腔注射,通过脂质体介导HIF-1αsiR-NA重组质粒pSUPERsiHIF-1α转染视网膜,有效地抑制了缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管模型视网膜中HIF-1α蛋白质的表达及视网膜新生血管的形成。

• 单位
  中南大学湘雅医院