肝X受体激动剂通过激活SIRT1信号级联改善Aβ诱导的视网膜色素上皮细胞炎症和凋亡反应

作者：甘敏; 周巧雅; 洪美静; 李雪; 彭惠^*

来源：第三军医大学学报, 2020, 42(14): 1398-1406.

DOI：10.16016/j.1000-5404.202003092

• 视网膜色素上皮
• 肝X受体
• 沉默信息调节因子1
• 淀粉样β
• 年龄相关性黄斑变性

目的探讨LXR-SIRT1调控轴在淀粉样β(amyloidβ, Aβ)诱导的视网膜上皮(retinal pigment epithelial, RPE)细胞炎症和凋亡中的作用。方法体外培养ARPE-19细胞系,收集湿性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)患者和正常受试者的人外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cell, PBMC)并检测其中沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1, SIRT1)的mRNA表达。用1.0、5.0μmol/L的Aβ1-40和5.0μmol/L Aβ40-1处理ARPE-19细胞24 h,Real-time PCR检测SIRT1、IL-1β、p21在ARPE-19细胞中的表达,探讨Aβ对ARPE-19细胞炎症、凋亡的影响。用5.0μmol/L Aβ1-40和5.0μmol/L TO90处理ARPE-19细胞,Western blot检测SIRT1、LXRα、ace-NF-κB、NF-κB、ace-p53、p53、p21的表达,研究Aβ1-40刺激及TO90预处理对SIRT1信号级联的影响。在敲低SIRT1后,Western blot检测NF-κB和p53信号通路的表达,进一步验证TO90对SIRT1信号级联的调控作用。结果 SIRT1在湿性AMD患者的PBMC中明显下调(P<0.01)。Aβ1-40刺激ARPE-19细胞后,SIRT1在mRNA及蛋白水平明显下调(P<0.05),p21在mRNA及蛋白水平明显上调(P<0.05),IL-1β在基因水平明显上调(P<0.05),ace-NF-κB、NF-κB、ace-p53、p53在蛋白水平显著上调(P<0.05),而TO90预处理则可逆转Aβ1-40对这些因子的调节(P<0.05)。SIRT1敲低后,TO90对ace-NF-κB、NF-κB、ace-p53、p53上调的逆转作用显著下降(P<0.05)。结论 LXR激动剂通过激活SIRT1信号级联改善Aβ诱导的ARPE-19细胞炎症及凋亡反应。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院