H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作平台的建立

作者：陈新武; 石晓娜; 潘学; 李雪松; 杨健美; 刘芹防; 陈鸿军; 滕巧泱^*; 李泽君^*

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(02): 61-65.

• 禽流感病毒
• H9N2
• 反向遗传操作系统
• 致病

H9N2亚型禽流感病毒(AIV)在自然界中广泛存在和传播,给养禽业造成了巨大损失。为了进一步揭示该病毒的致病机制,本研究采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒A/Chicken/Shanghai/1/2006(简称SH1)的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS 8个基因片段,并分别克隆至PLLB双向表达载体上。采用8质粒系统共转染293T细胞,转染48 h后加入TPCK胰酶作用2 h,将上清液和细胞一同接种9～11日龄SPF鸡胚,并检测其血凝效价。经序列比对,拯救获得的病毒rSH1的8个基因片段序列均与亲本病毒SH1的序列相同。实验结果表明,本研究成功建立了H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统,为该病毒的致病机理和传播机制研究等奠定了技术平台。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所