shRNA Twist基因对肺腺癌NCI-H1299细胞增殖和侵袭影响的研究

作者：韩英; 黄佳; 陈俊^*

来源：中国医师杂志, 2019, 21(10).

• 细胞系,肿瘤
• 腺癌
• 肺肿瘤
• RNA,小分子干扰
• 细胞增殖
• 细胞迁移分析

目的探究shRNA Twist基因对肺腺癌NCI-H1299细胞增殖和侵袭影响的机制。方法构建Twist的si RNA干扰表达载体,将NCI-H1299细胞分成3组,即空白对照组,阴性对照组和实验组。空白对照组为未做任何处理的细胞组,阴性对照组是经空白载体的慢病毒转染的细胞组,实验组是由shRNA Twist的慢病毒干扰载体构建的慢病毒转染细胞组。q RT-PCR和Western blot等方法检测Twist的表达; Transwell试剂盒检测细胞侵袭; CCK-8试剂盒检测细胞增殖。结果⑴慢病毒滴度的检测结果:shRNA-Twist载体慢病毒转染滴度为3×108TU/ml;⑵q RT-PCR检测结果显示,实验组和阴性对照组相比,Twist的m RNA的相对表达量明显降低,差异有统计学意义(q=3. 177,P=0. 0234)。⑶Western blot检测结果显示,实验组和阴性对照组相比,Twist蛋白相对表达量明显降低,差异有统计学意义(q=4. 071,P=0. 0304)。⑷Transwell实验结果显示,三组之间细胞迁移比较差异具有统计学意义(F=19. 472,P=0. 000)。其中实验组和阴性对照组相比,迁移数量明显降低,差异有统计学意义(q=3. 567,P=0. 0318)。⑸CCK-8检测结果显示,三组增殖率比较差异有统计学意义(F=20. 983,P=0. 000)。实验组与阴性对照组比较增殖率明显降低,差异有统计学意义(q=5. 272,P=0. 0157)。结论 shRNA Twist基因可以明显抑制肺腺癌NCI-H1299细胞的增殖和侵袭。

• 单位
  宁波市鄞州人民医院