体外无血清培养新生SD大鼠视网膜神经细胞

作者：马伟; 罗燕; 李涛; 李士清; 唐仕波

来源：眼科新进展, 2011, 31(12): 1111-1114.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2011.12.021

• 视网膜
• 光感受器细胞
• 体外细胞培养
• 大鼠

目的采用无血清培养建立新生SD大鼠视网膜神经细胞的体外培养方法,为视网膜神经细胞的体外实验研究奠定基础。方法取出生后3～5d的SD大鼠视网膜,用胰蛋白酶消化分离获取细胞悬液,使用无血清神经原培养基(NeurobasalTM-A Medium)和添加剂B-27 Supplement Minus AO进行培养。倒置相差显微镜观察细胞形态及轴突生长情况。培养至第5天,用抗微管相关蛋白2抗体、抗视紫红质蛋白抗体及抗胶质纤维酸性蛋白抗体,行免疫细胞化学鉴定并计算视网膜视杆细胞的纯度。结果采用无血清法培养的视网膜神经细胞生长良好,细胞伸出突起,部分神经元的突起交织呈网状。生长至第5天经免疫细胞化学证实其中神经元细胞占95.6%,而38.6%为视网膜视杆细胞,同时神经胶质细胞的生长得到了很好地抑制。结论无血清培养法可以获取纯度较高的视网膜神经细胞,为研究视网膜光感受器细胞提供了理想的体外实验模型。

• 单位
  中山大学中山眼科中心; 眼科学国家重点实验室