慢病毒介导miR-145对骨肉瘤MG-63细胞侵袭和迁移力的影响

作者：兰贺军; 赵振伟; 贾春

来源：福建医科大学学报, 2018, 52(03): 144-148.

• 骨肉瘤
• 微小RNA
• 血管内皮生长因子
• 细胞运动

目的探讨慢病毒介导miR-145对成骨肉瘤细胞MG-63侵袭及迁移能力的影响。方法通过慢病毒携带miR-145表达载体转染骨肉瘤MG-63细胞,实验分为:转染组(转染miR-145阳性序列)、对照组(转染阴性对照序列)、空白组(PBS)。利用生物信息学软件预测血管内皮生长因子(VEGF)为miR-145的候选靶基因,利用双荧光素酶报告基因检测验证miR-145对靶基因VEGF的直接调控作用。实时荧光定量PCR检测基因表达,Western-blot检测蛋白表达,Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移运动能力。结果与对照组比较,转染组细胞内荧光素酶活性明显下降(P<0.05);与对照组和空白组比较,转染组miR-145mRNA的表达量显著增加(P<0.05),VEGF mRNA及蛋白表达量显著减少(P<0.05),穿膜细胞数及细胞划痕愈合率均显著降低(P<0.05)。结论 miR-145通过靶向VEGF基因,进而抑制骨肉瘤MG-63细胞的侵袭及迁移能力。

• 单位
  开滦总医院林西医院