BTV和PPRV双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者：勾倩倩; 杜吉革; ***; 李倩琳; 赵洋; 钱莺娟; 印春生^*; 郑龙三^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(03): 285-291.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0040

• 蓝舌病病毒
• 小反刍兽疫病毒
• 双重荧光定量RT-PCR

为建立一种能够同时检测蓝舌病病毒（BTV）和小反刍兽疫病毒（PPRV）的快速检测方法，本研究选取蓝舌病病毒的NS3基因和小反刍兽疫病毒的N基因作为靶基因，参照GenBank上公布的两种基因序列，通过序列比对后选取一段保守性较高的区域，利用Beacon designer 8设计引物和探针并优化反应体系及反应条件，建立了双重荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示，该方法检测BTV和PPRV阳性质粒标准品的最低检出量分别为1.7 copies/μL和1.2 copeis/μL；与山羊痘病毒、羊口疮病毒、口蹄疫病毒、羊腐败性梭菌、布氏杆菌及弓形虫无交叉反应，具有良好的特异性；其组间重复性和组内重复性的变异系数均小于2%，表明该方法具有较好的重复性。结果表明，建立的双重荧光定量RT-PCR检测方法适用于BTV和PPRV的快速检测。

• 单位
  农业部; 中国兽医药品监察所