摘要
目的 :研究热环境对纹状体神经元生长、凋亡的影响 ,探讨热环境刺激对神经系统损伤的机理 ,为筛选新的预防和治疗热环境损伤的药物提供参考。方法 :原代培养的纹状体神经元用抗神经丝蛋白 (NF)、抗神经元特异的烯醇化酶 (NSE)和抗酪氨酸羟化酶 (TH)的抗体进行免疫细胞化学染色鉴定 ,计数NF阳性细胞百分比。细胞在(4 3 0± 0 2 )℃ ,10 %的CO2 条件下培养 1h造成热环境处理模型 ,立即用PI/H332 5 8双染色、台盼蓝染色、活性caspase- 3和原位末端转移酶 (TdT)染色等方法分别检测坏死和凋亡细胞 ,同时采用体视学分析神经元体积大小。结果 :正常培养的纹状体神经元在接种 7- 9d成熟 ,胞体饱满 ,呈NF、NSE和TH阳性。PI/H332 5 8双染色结果表明 ,急性热环境处理时发生的细胞凋亡的百分比较少 ,而坏死比例明显增加 ;台盼蓝染色计数结果表明 ,细胞总数明显减少 ,同时坏死细胞的比例增加了 10倍左右 ;活性caspase - 3和TdT以及细胞体积的分析结果表明 ,热环境刺激引起神经元细胞数目减少 ,同时小幅度增加了细胞凋亡的发生。结论 :4 3℃的热环境处理 1h ,导致纹状体细胞数目减少 ,引起细胞死亡主要通过坏死途径 ,凋亡比例较少。
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单位军事医学科学院基础医学研究所