生长抑素基因疫苗pVAX1-TRX-SS的构建及对猪生长的影响

作者：黄志鹏; 陈婷; 孙加节; 习欠云; 史合群; 张永亮^*

来源：中国兽医学报, 2018, 38(12): 2360-2365.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.12.23

• 生长抑素
• 电击处理
• 去势公猪
• 生长性能

用带有生长抑素CDS(sequence coding for amino acids in protein)区的引物,以pET32a(+)中的TRX标记基因为模板,扩增获得生长抑素(somatostatin,SS)-硫氧还原蛋白(thioredoxin,TRX)基因,并将该段基因插入pVAX1质粒载体中,构建pVAX1-TRX-SS真核表达质粒,酶切和测序鉴定表明质粒构建正确。用Lipofectamine~2000Reagent将上述质粒转染CHO细胞进行瞬时表达,24h后提取细胞总蛋白,Western blot能检测到目的蛋白。选取60日龄去势公猪18头,随机分为3组,分别于半膜肌注射0mg(生理盐水),1mg和2mg pVAX1-TRX-SS质粒,生理盐水对照组为Ⅰ组,1mg和2mg组分别为Ⅱ和Ⅲ组,注射后用活体基因导入仪电击处理。结果显示,免疫后5周,Ⅱ组和Ⅲ组平均日增重分别比Ⅰ组提高13.92%(P<0.05)和11.40%(P>0.05),料重比分别降低了6.19%和3.33%(P>0.05)。免疫后2周,Ⅱ组血清中生长抑素含量显著低于Ⅰ组;Ⅲ组血清中生长抑素含量则在免疫后4周显著低于Ⅰ组。Ⅱ组生长抑素抗体阳性率于免疫后4周达到峰值80%,Ⅲ组则在免疫后4周达到80%并维持到免疫后6周。上述结果表明,pVAX1-TRX-SS真核表达质粒能在真核细胞中表达,免疫猪后使猪产生了生长抑素抗体,有效中和了内源性生长抑素,对猪的生长有一定促进作用。

• 单位
  华南农业大学; 广州市创唯曦旺生物科技有限公司