Hyper-IL-6重组腺病毒的制备

作者：王传敏; 郄春花; 秦波

来源：中国现代医学杂志, 2009, (07): 1003-1006.

• 重组腺病毒
• 293细胞
• 超级白细胞介素6
• 基因治疗 recombinant adenovirus
• 293 cell
• hyper-IL-6
• gene therapy

目的探讨大量制备高滴度重组腺病毒的方法。方法以Pac-I酶切Hyper-IL-6重组腺病毒(AdHIL-6)质粒,乙醇沉淀回收DNA,将线性化的AdHIL-6质粒经脂质体转染293细胞进行病毒的包装扩增,以氯化铯密度梯度离心法纯化重组腺病毒,根据GFP(绿色荧光蛋白)计数法和有限稀释法原理测定病毒滴度及感染293细胞、L02细胞的MOI(Multiplicity of infection,感染复数),并以免疫细胞化学检测感染L02细胞后目的蛋白Hyper-IL-6的表达。结果收集的病毒液经PCR扩增出目的条带,测得病毒滴度为1.6×109pfu/mL,AdHIL-6感染293细胞、L02细胞的...

• 单位
  天津市第二人民医院; 重庆医科大学附属第二医院